α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒
簡(jiǎn)要描述:α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒貨號(hào):RC-S9H2077應(yīng)用:定性/定量/酶活檢測(cè)樣本:血清,血漿,唾液,尿液,組織,細(xì)胞上清,裂解液等適應(yīng)物種:人,小鼠,大鼠,植物,魚(yú),蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物
- 產(chǎn)品型號(hào):
- 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間:2024-07-08
- 訪 問(wèn) 量:315
產(chǎn)品名稱:α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒
品牌:睿創(chuàng)
貨號(hào):RC-S9H2077
規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:分光光度法
英文名稱:αKetoglutaratedehydrogenase(α-KGDHtestbox
本品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不用于臨床。
α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒樣本制備:
血清(血漿)樣本的制備
血清和血漿均是不含細(xì)胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板,血漿則含有凝血因子,它們的制備方法如下:
1) 血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置于37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡并離心(一般為1000-2000g,離心 5~10 min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細(xì)胞成分),分裝備用。
2) 血漿的制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿。初用者將上清移至另一清潔容器,吸出血漿時(shí)用毛細(xì)吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細(xì)胞成分。
組織或細(xì)胞勻漿樣本的制備
收集組織或細(xì)胞樣本,加入勻漿介質(zhì)后進(jìn)行勻漿,有4種勻漿方式可以選擇。
1) 手工勻漿:將樣本(含勻漿介質(zhì))倒入玻璃勻漿管中,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的容器中,右手將搗桿垂直插入勻漿管中,上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次(6-8 min),使組織勻漿化。
2) 機(jī)械勻漿:將已稱重的組織裝入EP管,加入勻漿介質(zhì),用組織勻漿機(jī),在冰水浴條件下,60 Hz,90s研磨制成組織勻漿,皮膚、肌肉組織及植物組織等可適當(dāng)延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。
3) 超聲破碎:用超聲波發(fā)生器以振幅14 μm超聲處理30s,在冰水浴條件下,破碎細(xì)胞;或者用超聲波破碎儀,200 W,2s/次,間隙3s進(jìn)行處理,總時(shí)間5min。
4) 反復(fù)凍融:適用于細(xì)胞樣本,即用低滲液或雙蒸水重懸細(xì)胞,再將細(xì)胞懸液進(jìn)行“冷凍-融化-冷凍"循環(huán),重復(fù)3次左右。
值得注意的是,此方法使的某些酶的活力受影響。因此,檢測(cè)細(xì)胞樣本的酶活力時(shí)不推薦使用此方法。
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